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宁波永新自适应光学在双光子光片荧光显微镜中的应用研究

[导读]生物荧光显微镜采用荧光标记技术对生物体进行特异性结构和功能成像,是目前广泛使用的生物成像研究工具。宁波永新光学股份有限公司介绍其中光片荧光显微镜在对活体生物长时间高速成像方面具有独特的优势。光片显微镜采用照明和成像正交的光路结构,可以对生物样本进行快速片层面照明成像。

与传统荧光显微镜相比,成像速度快且没有非焦面荧光成像干扰和光漂白问题。新型双光子光片显微镜进一步地发展了光片显微镜的优势,采用受生物体散射影响小的近红外波段飞秒脉冲光照明,利用扫描器件快速扫描形成的双光子虚拟光片,可以实现对生物深处大视场光片照明成像。宁波永新光学股份有限公司但当前先进双光子光片显微镜的高分辨率(1μm)光片照明深度局限在170μm×170μm。这是因为活体生物组织是折射率不均匀的光学介质,双光子照明光在传播到生物组织深处的过程中会受到生物像差的影响,使得双光子照明聚焦光点严重弥散,能量集中度下降,光片厚度显著增加,严重时甚至无法激发荧光成像。宁波永新光学股份有限公司引用针对上述问题,为消除生物像差的影响,本论文将直接波前探测自适应光学技术应用于双光子光片显微镜照明光路中,开展以下研究工作:针对自适应波前校正和双光子光片显微镜有机结合的问题,根据双光子光片显微镜的扫描特点和生物像差空间。

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